主题 | 2007年推荐 | 2013年推荐 |
待测标本 | 所有原发乳腺癌标本和转移灶标本中至少应有一例接受HER2检测 | 所有新诊乳腺癌患者均必须行HER2检测。如果可获得相应组织样本，随后发展为转移性疾病的患者应进行转移灶HER2检测。 |
HER2最优检测方案 | HER2阳性的标准为IHC HER2 3+（定义为> 30%的侵袭性肿瘤细胞有均匀的强膜染色）或FISH扩增（定义为HER2与CEP17的比值> 2.2或HER2基因平均拷贝数或在此检测系统中不使用内部参照探针时信号/核的比值大于6） | 出现以下结果时必须报告HER2检测结果为阳性： IHC 3+ 且周向膜染色完整、强烈 单探针平均HER2拷贝数 ≥6.0信号因子/细胞 双探针HER2/CEP17比≥2.0；且平均HER2基因拷贝数≥4.0信号/细胞 双探针HER2/CEP17比≥2.0；且平均HER2基因拷贝数≥4.0信号/细胞 双探针HER2/CEP17比<2；且平均基因拷贝数≥6信号因子/细胞 |
| HER2阳性疑似定义为： 当检测体系无内部参照探针时，IHC 2+或FISH HER2/CEP17比值为1.8—2.2或平均HER2基因拷贝数为4—6HER2信号因子/细胞 | 当HER2检测结果出现如下结果时必须报告存疑或需重检（相同的样品，不同的检测方法）或重新检测（如果可行则利用新样品、同样的检测方法或新的检测方法）： >10%的侵袭性肿瘤细胞出现IHC 2+且周向膜染色不完整或/和染色弱或一般 或膜染色强且完整的侵袭性肿瘤细胞数量≤10% 以下情形属ISH疑似： 单探针原位杂交HER2平均拷贝数≥4和＜6信号因子/细胞 双探针HER2/CEP17比小于2且平均HER2拷贝数≥4和＜6信号因子/细胞 |
| HER2阴性定义为： IHC HER20：无染色 IHC HER21+：染色弱不完整 所有部位的肿瘤细胞膜染色均不完整且染色弱，或<10%的细胞膜染色完整但染色弱 若检测体系无内参探针，FISH HER2/CEP17比率<1.8或平均HER2基因拷贝数<4信号因子/细胞 | 若一次检测（或两次）的HER2检测结果出现如下情形时则必须报告为阴性： IHC 1+定义为>10%的侵袭性肿瘤细胞出现微弱的/几乎察觉不到的不完整膜染色 IHC 0定义为在≤10%的侵袭性肿瘤细胞中观察不到染色或膜染色不完整或几乎察觉不到 基于以下情形判断ISH为阴性： 单探针平均HER2基因拷贝数 <4.0信号因子/细胞 双探针HER2/CEP17比值小于2，且平均HER2拷贝数小于4信号因子/细胞 |
| HER2不明确 | 出现以下情形则必须报告HER2检测不明确，避免组织经一种或两种检测（IHC和FISH）后报告为阴性、阳性或疑似 可能的情况包括： 标本处理不恰当 结果不典型或出现边缘效应，难以解释 分析检测失败 要求对另一标本进行检测以确定HER2状态。检测结果不明确的原因应在报告评论部分加以说明 |
ISH不合格标准 | 出现如下情况则认为检测不合格且不应重复： 控制（参照）未达到预期 观察者不能找到至少两个侵袭性细胞的区域视野 超过25%的信号因太微弱而不能判定 超过10%的信号出现在细胞质 核分辨率较差 自发荧光太强 | 与前版相同，报告HER2试验结果为不明确，且在报告中说明以上所述参数 |
ISH解读 | 在至少计数20个细胞的基础上解读，病理学家必须确认计数侵袭性肿瘤所须遵循的准则 | 病理学家须扫描整个切片然后计数20个细胞，或使用免疫组化来定义潜在的HER2扩增 若还有另一细胞群体呈现HER信号/细胞数目比值增多，且该细胞群超过切片肿瘤细胞总数的10%（定义为ISH和IHC切片内成像分析和视野内分析），还需要对该细胞群的至少20个细胞作另次计数并报告 对于明场ISH，计数要求比较正常乳腺细胞和乳腺癌细胞两种细胞模式，因为人工方式很难解读，如果肿瘤细胞模式既非正常也不能明确扩增，则应提交专家判断 |
可接受的ISH和IHC检测 |
| 应优先选用FDA批准的IHC、明场ISH、或FISH方案 |
IHC不合格标准 | 出现如下情形时则判为检测不合格并重复或使用FISH检测 对照未达预期 大部分样本有人工污染 样本正常的乳腺组织（对照）有强膜染色 | 相同 |
IHC解读标准 | HER2阳性结果要求> 30%的侵袭性肿瘤细胞有均匀的暗环染色 多种合理方法的解读结果应一致 | 需超过10%的肿瘤细胞显示均匀的暗环模式才能解读IHC检测结果为3+HER2阳性 |
所有检测方案的报告要求 | 报告必须包含指南中所指出的所有要素 | 除补充数据9和10外其他均一样 |
最佳组织处理要求 | 从组织采集到固定的时间应尽量缩短，供HER2检测的样本应由10%中性福尔马林缓冲液固定6—48个小时；细胞学检测标本必须固定在福尔马林溶液中 样本切片厚度应在5毫米到10毫米之间，并放置在足够的福尔马林溶液中 | 固定时间从6—48小时延长为6—72小时。 任何例外的处理过程都应在报告中说明 |
最佳组织切片要求 | 超过6周的切片不宜再用，视初始固定方法和储存条件而定 | 相同 |
最佳内部验证程序 | 在进行检测之前需进行验证 | 相同 |
最佳初始检测验证 | 初始检测验证要求25—100样本（在同一实验室用替代性方法进行，或在另一实验室验证） | 实验室进行上述验证试验应遵循所有的认证要求，其中包括初始检测验证。实验室初步验证应确保符合2010年版ASCO/CAP推荐之对ER和PgR进行IHC检测的要求，FDA批准的方案应有至少20例阳性样本和20例阴性样本，而 LDTs则要求至少有40例阳性样本和40例阴性样本。以上要求不适用于2007版 ASCO/CAP HER2检测验证的方案，以及外部常规HER2检测，如CAP提供的方案 |
不同方案检测一致性的最佳监测 | 必须在检测开始前进行一致性验证，并选取最佳方案。对于任何一种检测方案，如果一致性低于95%（无论是FISH还是IHC），在给出最终结果解读之前必须进行替代性方案的检验 | 参见下文 |
最佳内部控制程序 |
| 应对每一批次和每一个检测审查并记录外部和内部对照 |
| 持续的质量控制和设备维护 | 相同 |
| 初始和此后的实验室人员培训和能力评估 | 相同 |
| 使用标准化操作程序（包括对照材料的常规使用） | 相同 |
| 若有变化则需要重新验证 | 相同 |
| 病理学家应进行持续的能力评估和培训 | 应将能力评估和实验室行为纳入实验室记录 |
最佳实验室验证 | 每年自检，每隔一年进行一次现场检查 审查项目包括实验室验证、程序、检测结果与过程、结果和报告 若实验室HER2检测结果不满意，则暂停此种方法的检测 | 相同 |
